Evidencia molecular de Leptospira interrogans sensu stricto en Cavia porcellus (cuyes) destinados para el consumo humano en el municipio de Pasto, Nariño / Molecular evidence of Leptospira interrogans sensu stricto in Cavia porcellus (guinea pig) grown for human consumption in Pasto, Nariño

Introducción: La leptospirosis es una zoonosis emergente, endémica en Colombia, que afecta tanto animales domésticos como silvestres. Es considerada de riesgo laboral, ya que la transmisión al ser humano está asociada a la exposición con animales o ambientes infectados. En el departamento de Nariño, la producción de cuyes para el consumo humano se realiza en sistemas de crianza tradicionales que podrían favorecer la infección por Leptospira interrogans en esta especie. Objetivo: Detectar molecularmente la infección natural por especies patógenas del género Leptospira en cuyes que son destinados para el consumo humano en el municipio de Pasto. Materiales y métodos: Se tomaron 270 muestras de tejido renal en cuyes sacrificados en dos mataderos. Las muestras fueron analizadas mediante Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) convencional y coloración diferencial de Warthin Starry (W-S). Resultados: En la evaluación de las 270 muestras, 4 (1,5%) fueron positivas para PCR y una de las muestras demostró la presencia de Leptospira bajo tinción W-S. Conclusiones: Mediante el uso de técnicas moleculares se evidenció L. interrogans en el tejido renal de Cavia porcellus. La circulación del patógeno en esta población representa un riesgo de infección para humanos y animales domésticos en contacto con estos sistemas productivos.

Introduction: Leptospirosis is an emerging zoonosis that is endemic in Colombia and affects both domestic and wild animals. It is considered an occupational risk since human transmission is associated with exposure to infected animals or environments. In the department of Nariño, the production of guinea pigs for human consumption applies traditional rearing systems that could cause animals to get infected with Leptosipira interrogans. Objective: To molecularly identify natural infection by pathogenic species of the genus Leptospira in guinea pigs used for human consumption in the municipality of Pasto (Colombia). Materials and methods: 270 kidney tissue samples were taken from guinea pigs slaughtered in two facilities. Samples were analyzed through conventional polymerase chain reaction (PCR) and Warthin Starry (W-S) differential staining. Results: While 4 (1.5%) out of the 270 samples were categorized as positive using PCR, only 1 sample showed the presence of Leptospira through W-S staining. Conclusions: Molecular techniques were useful to identify L. interrogans in kidney tissue of Cavia porcellus. Dissemination of this pathogen within this population represents an infection risk for humans and domestic animals that are in close proximity to these productive systems.

Natural infection with Trypanosoma cruzi in bats captured in Campeche and Yucatán, México / Infección natural con Trypanosoma cruzi en murciélagos capturados en Campeche y Yucatán, México

Abstract | Introduction: Bats have been reported as hosts of the Trypanosoma cruzi protozoan, the etiologic agent of American trypanosomiasis, an endemic zoonotic disease in México. Objective: To describe T. cruzi infection in bats from the states of Campeche and Yucatán, México. Materials and methods: Captures were made from March to November, 2017 at three sites in Yucatán and one in Campeche. Up to four mist nets on two consecutive nights were used for the capture. The bats' species were identified and euthanasia was performed to collect kidney and heart samples for total DNA extraction. Trypanosoma cruzi infection was detected by conventional PCR with the amplification of a fragment belonging to the T. cruzi DNA nuclear. Results: Eighty-six bats belonging to five families (Vespertilionidae, Noctilionidae, Mormoopidae, Phyllostomidae, and Molossidae) and 13 species (Rhogeessa aeneus, Noctilio leporinus, Pteronotus davyi, P. parnellii, Artibeus jamaicensis, A. lituratus, A. phaeotis, Glossophaga soricina, Carollia sowelli, Chiroderma villosum, Uroderma bilobatum, Sturnira parvidens, and Molossus rufus) were captured. Infection frequency by PCR was 30,2% (26/86) detected only in the renal tissue. The infected species were P. parnellii, G. soricina, A. lituratus, A. jamaicensis, S. parvidens, C. villosum, and R. aeneus. Conclusions: Our results confirmed the participation of several bat species as hosts in the T. cruzi transmission cycle in the region. Further studies are necessary to establish the importance of these animals in the zoonotic transmission of T. cruzi.

Resumen | Introducción. Los murciélagos se han reportado como huéspedes del protozoario Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la tripanosomiasis americana, enfermedad zoonótica endémica en México. Objetivo. Describir la infección con T. cruzi en murciélagos capturados en los estados de Campeche y Yucatán, México. Materiales y métodos. Se realizaron capturas de marzo a noviembre de 2017 en tres sitios de Yucatán y uno de Campeche. Para la captura se emplearon hasta cuatro redes de niebla por dos noches consecutivas. Se identificó la especie de los murciélagos capturados y se les practicó la eutanasia para recolectar muestras de riñón y corazón, utilizadas posteriormente en la extracción de ADN total. La infección con T. cruzi se detectó por la amplificación con PCR convencional de un fragmento perteneciente al ADN nuclear de T. cruzi. Resultados. Se capturaron 86 murciélagos pertenecientes a cinco familias (Vespertilionidae, Noctilionidae, Mormoopidae, Phyllostomidae, Molossidae) y 13 especies (Rhogeessa aeneus, Noctilio leporinus, Pteronotus davyi, P. parnellii, Artibeus jamaicensis, A. lituratus, A. phaeotis, Glossophaga soricina, Carollia sowelli, Chiroderma villosum, Uroderma bilobatum, Sturnira parvidens y Molossus rufus). La PCR mostró una frecuencia de infección de 30,2 % (26/86), detectada únicamente en tejido renal. Las especies infectadas fueron P. parnellii, G. soricina, A. lituratus, A. jamaicensis, S. parvidens, C. villosum y R. aeneus. Conclusiones. Los resultados confirmaron la participación de varias especies de murciélagos como huéspedes en el ciclo de transmisión de T. cruzi en la región. Es necesario realizar más estudios para determinar la importancia de estos animales en la transmisión zoonótica de T. cruzi.

Leptospira patógena en murciélagos de Campeche y Yucatán, México / Pathogenic Leptospira in bats from Campeche and Yucatán, Mexico

RESUMEN Objetivo. Reportar la infección con Leptospira en ríñones de murciélagos de Campeche y Yucatán, México, a través de la amplificación por PCR de dos fragmentos distintos del gen 16S RNA ribosomal. Materiales y métodos. Se realizaron capturas en un sitio de Campeche y dos de Yucatán. A los murciélagos capturados se les aplicó la eutanasia y se les realizó una necropsia para recolectar tejido renal que se usó en la extracción de ADN total. Se realizaron dos PCR convencionales para la amplificación de los fragmentos de 16S RNA ribosomal. Se obtuvieron las secuencias de algunos productos positivos y se analizaron con herramientas bioinformáticas para identificar la especie infectante de Leptospira. Resultados. Se capturaron 69 murciélagos pertenecientes a cuatro familias y a ocho especies distintas. La familia con mayor diversidad fue Phyllostomidae con cinco especies. La especie con mayor frecuencia de captura fue Artibeusjamaicensis (41, 59.4%). Las PCR arrojaron una frecuencia global de infección de 21.7%. Las especies infectadas fueron A. jamaicensis, Pteronotus parnellii y Chiroderma villosum. El análisis bioinformático arrojó un 99.0% de identidad para Leptospira noguchii, Leptospira borgpetersenii y Leptospira santarosai. Conclusiones. Algunas especies de murciélagos de Yucatán y Campeche son portadores renales de leptospiras patógenas, por lo que podrían participar en el ciclo silvestre de transmisión en la región. La frecuencia de infección encontrada en los riñones de los murciélagos utilizados es mayor en comparación con aquellas obtenidas en otros reservorios de Yucatán y Campeche. Nuevas especies de murciélagos son reportadas como portadores de Leptospira para México.

ABSTRACT Objective. To report the infection with Leptospira in the kidneys of bats from Campeche and Yucatán, Mexico, through the amplification by PCR of two different 16S RNA ribosomal gene fragments. Materials and methods. Bat captures were carried out at one site in Campeche and two sites in Yucatán. Euthanasia was applied to the captured bats and a necropsy was performed to collect a renal tissue sample that was used in the total DNA extraction. Two different conventional PCR were performed for the amplification of the 16S RNA ribosomal gene fragments. Some sequences from positive products were obtained and analyzed with bioinformatics tools to identify the infectious species of Leptospira. Results. Sixty-nine bats belonging to four families and eight different species were captured. The family with the greatest diversity was Phyllostomidae with five species. The most captured species was Artibeus jamaicensis (41, 59.4%). Both PCR showed a global infection frequency of 21.7%. The infected species were A. jamaicensis, Pteronotus parnellii, and Chiroderma villosum. The bioinformatic analysis of the positive products yielded a 99.0% identity for Leptospira noguchii, Leptospira borgpetersenii, and Leptospira santarosai. Conclusions. Some bat species of Yucatán and Campeche, Mexico, are renal carriers of pathogenic Leptospira, therefore participating in the transmission cycle in the region. The frequency of infection found in the renal tissue of the captured bats is higher than the one obtained from other reservoirs captured in Yucatán and Campeche. New species of bats are reported as renal Leptospira carriers in Mexico.

Deficiencia selectiva de inmunoglobulina A: manifestaciones clínicas, hallazgos de laboratorio y diagnóstico preciso / Selective Immunoglobulin A deficiency: clinical manifestations, laboratory findings and accurate diagnosis

Resumen La inmunoglobulina A (IgA) es el isotipo de anticuerpo más abundante en los humanos y fundamentalmente participa en la defensa contra las infecciones y el desarrollo de la tolerancia inmune en las mucosas. La deficiencia de IgA es la inmunodeficiencia más frecuente en humanos, pero comúnmente es asintomática y transitoria. Para diagnosticarla, se cuantifica la concentración de IgA en sangre y se evalúa la magnitud de su disminución. De acuerdo con esta evaluación se clasifica en deficiencia parcial (DPIgA) o deficiencia total (DTIgA). Adicionalmente, si solo se afectan los niveles de IgA sin alteraciones de otras inmunoglobulinas séricas como IgM e IgG o subclases de inmunoglobulina G, entonces se denomina como deficiencia selectiva de IgA (DSIgA). La deficiencia selectiva de IgA es de mayor relevancia clínica y considerada un error innato de la inmunidad, aunque su etiología aún es desconocida y clínicamente se asocia a infecciones de los tractos respiratorio y gastrointestinal, alergias y manifestaciones autoinmunes. Se realizó una búsqueda de artículos científicos en PubMed, Scopus, SciELO y Redalyc sobre la deficiencia selectiva de inmunoglobulina A, con el objetivo de realizar una revisión temática sobre las manifestaciones clínicas, el diagnóstico y el adecuado manejo clínico de los pacientes con esta inmunodeficiencia. Se propone un nuevo algoritmo clínico con el objetivo de mejorar el diagnóstico y brindar un adecuado manejo clínico de los pacientes con esta inmunodeficiencia. Un paciente con deficiencia selectiva de IgA se caracteriza por infecciones recurrentes de los tractos gastrointestinal y respiratorio, en asociación con manifestaciones alérgicas y autoinmunes en individuos mayores de cuatro años, con niveles de IgA sérica menores de 7 mg/dL y con niveles normales de IgG e IgM, y en quienes se hayan descartado defectos relacionados con los linfocitos T u otras causas de hipogammaglobulinemia. Con respecto al manejo clínico, se deben ajustar los esquemas de vacunación e implementar profilaxis antibiótica en las infecciones graves y recurrentes. Para mejorar el pronóstico se debe realizar una atención del paciente por un equipo médico interdisciplinario y un seguimiento continuo por un prolongado periodo de tiempo.

Abstract Immunoglobulin A (IgA) is the most abundant antibody isotype in humans and participates in protection against infections and the development of immune tolerance in mucous membranes. IgA deficiency is the most common immunodeficiency in humans, but it is commonly asymptomatic and transient. To diagnose it, the concentration of IgA in blood is quantified and the magnitude of its decrease is evaluated. According to this evaluation, it is classified as partial deficiency (DPIgA) or total deficiency (DTIgA). Additionally, if only IgA levels are affected without alterations in other serum immunoglobulins such as IgM and IgG or subclasses of IgG, then it is referred to as selective IgA deficiency (DSIgA). Selective IgA deficiency is of greater clinical relevance and considered an innate immunity error, although its etiology is still unknown. This immunodeficiency is clinically associated with respiratory and gas- trointestinal tract infections, allergies and autoimmune manifestations. A search of scientific articles was conducted in bibliographic databases PubMed, Scopus, SciELO and Redalyc on selective immunoglobulin A deficiency. Our objective was to perform a review on clinical manifestations, diagnosis, and appropriate clinical management of patients with this immunodeficiency. A new clinical algorithm is proposed in order to improve the diagnosis and provide adequate clinical management of patients with this immunodeficiency. A patient with selective IgA deficiency is characterized by recurrent infections of the gastrointestinal and respiratory tracts, in association with allergic and autoimmune manifestations in individuals older than four years. Serum IgA levels are less than 7 mg/dL, with normal levels of IgG and IgM, and defects related to T lymphocytes or other causes of hypogammaglobulinemia have been ruled out. Regarding clinical management, vaccination schedules should be adjusted and antibiotic prophylaxis should be implemented in severe and recurrent infections. Additionally, to improve prognosis, patient care should be performed by an interdisciplinary medical team and continuous monitoring for a prolonged period of time.

Infección con Toxoplasma gondii (Eucoccidiorida: Sarcocystidae) en murciélagos de Campeche y Yucatán, México

Toxoplasma gondii es un protozoario parásito reconocido como el agente causal de la toxoplasmosis, enfermedad zoonótica que afecta a humanos y animales domésticos o silvestres. En México, representa un problema de salud pública y veterinaria, sobre todo en regiones con climas tropicales y subtropicales. Los murciélagos han sido identificados como hospederos accidentales en el ciclo de transmisión; no obstante, en México no existe información previa; por lo tanto, el objetivo del presente estudio es reportar la infección con T. gondii en murciélagos capturados en sitios de los estados de Campeche y Yucatán, México. Se capturaron murciélagos en dos sitios de Yucatán y uno de Campeche, ubicados en la Península de Yucatán. Se recolectaron riñones, bazo e hígado y se emplearon en la extracción de ADN total. La infección con T. gondii se detectó a través de la amplificación de un fragmento del gen B1, utilizando PCR anidada. Los productos positivos fueron purificados y enviados a secuenciación para su posterior análisis de alineamiento; adicionalmente, se construyó un árbol filogenético. Se analizaron un total de 69 murciélagos pertenecientes a ocho especies distintas: 41 (59.4 %, 41/69) Artibeus jamaicensis; seis (8.7 %, 6/69) Pteronotus parnellii; seis (8.7 %, 6/69) Noctilio leporinus; seis (8.7 %, 6/69) Chiroderma villosum; cuatro (5.8 %, 4/69) Glossophaga soricina; dos (2.9 %, 2/69) Carollia sowelli; dos (2.89 %, 2/69) Artibeus lituratus y dos (2.9%, 2/69) Rhogeessa aeneus. La PCR anidada identificó ocho (11.6 %, 8/69) murciélagos positivos a la infección: seis (75 %, 6/8) A. jamaicensis, capturados en X'matkuil y Panabá, un (12.5 %, 1/8) G. soricina y un (12.5 %, 1/8) C. villosum, ambos capturados en Panabá. El análisis de alineamiento arrojó 99-100 % para cobertura y 97-99 % para identidad respecto a secuencias de T. gondii. Nuestros resultados aportan al entendimiento del ciclo de transmisión de T. gondii en la región; sin embargo, son necesarias investigaciones futuras para determinar los genotipos circulantes, ya que estudios anteriores han demostrado que estos animales pueden estar infectados con genotipos identificados en otros animales domésticos o silvestres e incluso en humanos.

Toxoplasma gondii is a protozoan parasite recognized as the causative agent of toxoplasmosis, a zoonotic disease that affects humans and domestic or wild animals. In Mexico, it represents a public and animal health problem, especially in regions with tropical and subtropical climates. Bats have been reported as accidental hosts in the transmission cycle; however, there is no preceding information in Mexico. Therefore, the aim of the present study is to report the T. gondii infection in bats captured in sites of Campeche and Yucatan states, Mexico. Bats were captured in two sites in Yucatan (X'matkuil and Panaba) and one in Campeche (Hampolol), located in the Yucatan Peninsula. Kidneys, spleen, and liver were collected and used in the total DNA extraction. Toxoplasma gondii infection was detected through the amplification of a B1 gene fragment, using nested PCR. The positive PCR products were purified and sent to sequencing for a posterior sequence identity analysis. Additionally, a phylogenetic tree was made. A total of 69 bats belonging to eight different species were processed: 41 (59.4 %, 41/69) Artibeus jamaicensis; six (8.7 %, 6/69) Pteronotus parnellii; six (8.7 %, 6/69) Noctilio leporinus; six (8.7 %, 6/69) Chiroderma villosum; four (5.8 %, 4/69) Glossophaga soricina; two (2.9 %, 2/69) Carollia sowelli; two (2.89 %, 2/69) Artibeus lituratus; and two (2.9 %, 2/69) Rhogeessa aeneus. The nested PCR identified eight (11.6 %, 8/69) infected bats: six (75 %, 6/8) A. jamaicensis, captured in X'matkuil and Panaba, one (12.5 %, 1/8) G. soricina, and one (12.5 %, 1/8) C. villosum, both captured in Panaba. The alignment analysis yielded 99-100 % for cover and 97-99 % for identity to T. gondii sequences. Our results contribute to the understanding of the T. gondii transmission cycle in the region; however, future research is needed to determine circulating genotypes, as previous studies have demonstrated that these animals might be infected with identified genotypes in other domestic or wild animals and even in humans.

Brotes emergentes de leptospirosis del Amazonas colombiano / Emerging leptospirosis outbreaks in the Colombian Department of Amazonas

Se describe por primera vez una serie de nueve casos con clínica indicativa de leptospirosis en el municipio Puerto Nariño en el departamento Amazonas, Colombia. Se muestran evidencias serológicas de exposición con Rickettsia del grupo de las fiebres manchadas. Los casos fueron clínicamente considerados como síndrome febril de origen desconocido. Se descartó infección por dengue y malaria. El diagnóstico de Leptospira se realizó mediante el método de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real. Igualmente, se detectó la presencia de anticuerpos contra rickettsias del grupo de las fiebres manchadas por inmunofluorescencia Indirecta. Finalmente, se realiza revisión del tema(AU)

A description is provided for the first time of a series of nine cases with a clinical examination suggestive of leptospirosis in the municipality of Puerto Nariño, Department of Amazonas, Colombia. Serological evidence is presented of exposure to Rickettsia, spotted fever group. The cases were clinically considered as febrile syndrome of unknown origin. Infection with dengue or malaria was ruled out. Diagnosis of leptospirosis was achieved by real-time polymerase chain reaction. Additionally, indirect immunofluorescence detected the presence of antibodies against rickettsia, spotted fever group. Finally, a review was conducted about the topic(AU)

Genetic diversity of Leptospira in northwestern Colombia: first report of Leptospira santarosai as a recognised leptospirosis agent

The region of Antioquia in northeastern Colombia has the highest number of reported leptospirosis cases in the country. It also shows high seroprevalence indexes in the general population and socio-environmental conditions favourable for the transmission of the disease between humans and animals. In this study, 25 Leptospira isolates from Colombia’s Antioquia department were identified to the species level as L. santarosai (12), L. interrogans (9) and L. meyeri (4) using phylogenetic analysis of the Amidohydrolase gene. Typing at the serovar level was performed using multilocus sequence typing (MLST) and monoclonal antibodies. The serovars Canalzonae, Babudieri, Alice, Beye, and Copenhageni have been identified as causing human or animal infections in Antioquia, Colombia. The four environmental isolates were not identified to the serovar level. L. santarosai serovar Canalzonae and Alice were identified as new etiologic agents of human leptospirosis in Antioquia, Colombia. This paper reports species and serovars that were previously unknown in the region.

Desarrollo de herramientas moleculares para la genotipificación de especiesde Leptospira spp / Desarrollo de herramientas moleculares para la genotipificación de especies de Leptospira spp

Leptospirosis es causada por especies patógenas del género Leptospira, el cual incluye 20 especies, entre patógenas y saprófitas. Tradicionalmente se ha usado para su tipificación el método serológico que ha definido más de 250 serovariedades (1). Por ser un método ambiguo se han propuesto alternativas de genotipificación basadas en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Este estudio pretende realizar transferencia de metodologías moleculares disponibles sólo en laboratorios de referencia a nivel mundial, que permitan discriminar especies de Leptospira en forma universal y reproducible.